Assassin’s Creed: Brotherhood – це екшен від третьої особи. Гравці гратимуть за головного героя на ім’я Ецціо, який готовий знищити всіх тамплієрів. Настав кровавий конфлікт між ассасинами та тамплієрами, і гравець обирає сторону перших.
Основне завдання полягає в тому, щоб завершити таємний орден і встановити мир в Італії. Дії гри продовжують події другої частини проекту. Гравцям належить виконувати численні завдання, вбивати та просто подорожувати по місту. Як і раніше, Ецціо може підкуповувати, загрожувати та просто докучати різним особам. Події гри розгортаються на вулицях старовинного міста, і лише від дій гравця залежить, чи зможуть ассасини перемогти. Геймплей гри залишився без змін. Графіка також залишилася без змін, але тепер є мультиплеерний режим.
Завдяки цьому будь-хто може вжити образ одного з численних персонажів, щоб розпочати боротьбу з іншими учасниками режиму. Тут кожен гравець може насолодитися реалістичністю подій і відчути себе справжнім бійцем.